荧光显微镜的使用

- 2018-03-27 -

荧光显微镜基本操作

1.关闭房间内的电灯,开启显微镜汞灯;

2.根据样品标记的荧光素选择相应的滤光片;

3.放好样品,找到合适的视野;

4.如需拍照,请确认照相机内已装好彩色胶卷(最好使用27定胶卷);

5.开启自拍装置,选择手动档,通常拍摄速度在0.5-10秒内;

6.使用结束,关闭所有电源并做好使用记录。

荧光图像的记录方法

荧光显微镜所看到的荧光图像,一是具有形态学特征,二是具有荧光的颜色和亮度,在判断结果时,必须将二者结合起来综合判断。结果记录根据主观指标,即凭工作者目力观察。作为一般定性观察,基本上可靠的。随着技术科学的发展,在不同程度上采用客观指标记录判断结果,如用细胞分光光度计,图像分析仪等仪器。但这些仪器记录的结果,也必须结合主观的判断。

荧光显微镜摄影技术对于记录荧光图像十分必要,由于荧光很易褪色减弱,要即时摄影记录结果。方法与普通显微摄影技术基本相同。只是需要采用高速感光胶片即可。因紫外光对荧光猝灭作用大,如FITC的标记物,在紫外光下照射30s,荧光亮度降低50%。所以,曝光速度太慢,就不能将荧光图像拍摄下来。一般研究型荧光显微镜都有半自动或全自动显微摄影系统装置。

 

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